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| 內容簡介： |
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内容涉及分子生物学实验室基本知识、基础分子生物学技术原理与操作、分子生物学常用实验、分子生物学综合实验等篇章。内容编排上：1.去除了一些现在基本已经被淘汰的实验技术，增添了一些与时俱进的实验技术方法；2.为了顺应教学改革的需求，除了基础性实验，增加了更多的设计性和综合性的大实验，让学生通过实验可以对相关理论有更全面的认识，并推进研究工作的进程；3.为了顺应信息时代的发展，除了纸质版图书外，还增添二维码，学生可以通过扫描二维码获取相关实验动态操作过程和彩色图片结果，使学生更易于掌握相关理论知识；4.将组织招纳不同院校资深老师和知名生物公司高级技术人员参编，博采众家之长，对教材内容进行充分论证。
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| 關於作者： |
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教授，博士生导师，新世纪优秀人才，湖南省芙蓉学者特聘教授，湖南省121人才，血液学基础与应用湖南省重点实验室主任。
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| 目錄：
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第一篇 分子生物学实验基础
第一章 实验室基本知识/ 3
第一节 分子生物学实验室安全规则/ 3
第二节 分子生物学实验室常规设备简介/ 7
第二章 电泳/ 12
第一节 琼脂糖凝胶电泳/ 12
第二节 聚丙烯酰胺凝胶电泳/ 16
第三章 核酸的提取/ 22
第一节 基因组DNA 的提取/ 22
第二节 质粒DNA 的提取/ 27
第三节 线粒体DNA 的提取/ 29
第四节 总RNA 的提取/ 31
第五节 miRNA 的提取和富集/ 32
第四章 蛋白质的提取/ 35
第一节 细胞总蛋白质的提取/ 35
第二节 细胞质和细胞核蛋白质的提取/ 36
第三节 膜蛋白质的提取/ 37
第四节 线粒体蛋白质的提取/ 38
第五章 核酸和蛋白质提取浓度和纯度的检测/ 40
第一节 核酸的琼脂糖凝胶电泳检测 / 40
第二节 核酸的紫外分光光度法检测/ 42
第三节 蛋白质BCA 法浓度检测/ 45
第二篇 分子生物学常用实验
第六章 PCR 技术/ 53
第一节 PCR 引物的设计/ 53
第二节 普通PCR 参数的设置/ 55
第三节 RT-PCR/ 57
第四节 实时荧光定量PCR/ 60
第五节 甲基化特异性PCR/ 64
第六节 PCR 定点诱变/ 67
第七章 核酸分子杂交/ 71
第一节 核酸分子杂交探针的制备/ 71
第二节 Southern 印迹杂交/ 75
第三节 Northern 印迹杂交/ 79
第四节 斑点杂交/ 81
第五节 核酸原位杂交/ 83
第八章 蛋白质免疫检测/ 87
第一节 蛋白质免疫印迹技术/ 87
第二节 细胞免疫荧光染色/ 91
第三节 免疫组化/ 93
第九章 细胞培养和检测/ 96
第一节 原核细胞培养/ 96
第二节 哺乳动物细胞培养/ 99
第三节 细胞计数和生长曲线绘制/ 103
第四节 MTT 法检测细胞活力/ 106
第五节 细胞集落形成实验/ 108
第六节 细胞凋亡检测/ 109
第七节 细胞周期检测/ 113
第八节 细胞划痕实验/ 115
第九节 细胞Transwell 侵袭实验/ 116
第十节 激光共聚焦荧光显微镜检测技术/ 117
第三篇 分子生物学综合实验
第十章 核酸测序/ 123
第一节 自动激光荧光DNA 测序/ 123
第二节 全基因组DNA 高通量测序/ 126
第三节 外显子组测序/ 131
第四节 转录物组测序/ 134
第五节 单细胞转录物组测序/ 137
第十一章 DNA 体外重组与鉴定/ 143
第一节 限制性核酸内切酶消化法制备载体与目的DNA 片段/ 144
第二节 载体与目的DNA 的纯化/ 149
第三节 DNA 分子的体外连接/ 152
第四节 感受态细胞的制备和转化/ 155
第五节 重组质粒的筛选和鉴定/ 158
第六节 外源基因在大肠埃希氏菌中表达和蛋白质纯化/ 160
第十二章 哺乳动物细胞基因过表达、干扰及CRISPR/Cas9 编辑技术/ 163
第一节 质粒的细胞转染/ 163
第二节 萤光素酶报告基因检测/ 166
第三节 慢病毒细胞感染/ 168
第四节 siRNA 的细胞转染/ 170
第五节 CRISPR/Cas9 基因编辑技术/ 172
第十三章 核酸和蛋白质及蛋白质和蛋白质相互作用检测/ 176
第一节 DNA 和蛋白质相互作用检测/ 176
第二节 RNA 和蛋白质相互作用检测/ 188
第三节 蛋白质- 蛋白质之间相互作用的检测/ 194
第十四章 生物信息学数据库与生物信息学预测/ 201
第一节 常用生物信息学数据库/ 201
第二节 核酸序列分析/ 210
第三节 蛋白质序列分析/ 217
第四节 微RNA 靶基因的生物信息学预测/ 225
第五节 CpG 岛预测及甲基化PCR 引物设计/ 231
第六节 利用已有数据库分析差异表达基因/ 235
参考文献/ 244
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| 內容試閱：
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分子生物学是生命科学的一个重要分支，并已渗透到生命科学的各个领域，为许多相关学科提供重要的理论和技术支持。近年来，分子生物学技术发展飞速，新方法和新技术不断涌现，实验操作越来越便捷和流程化，实验应用领域越来越广泛。为了普及分子生物学技术，加强生命科学、基础医学和临床医学专业本科生和研究生的分子生物学实验教学，以及为广大生命科学教学与科研人员提供更深入专业的参考资料，我们在之前胡维新教授主编的《分子生物学常用实验操作》与刘静教授主编的《分子生物学实验指导》基础上进一步改进，编写了本部教材。
此次编写工作整合了中南大学、北京大学、湖南大学、海南医学院、湖南师范大学与郑州大学六所长期坚守在分子生物学教学与科研一线的高校教师力量，注重教材内容的实用性、通用性和先进性。编写风格上，除了参考国内外相关书籍，很多编者纳入了自身的实践经验，文字描述深入浅出，图文并茂。编写内容上除了实验原理、器材、试剂、操作步骤和注意事项外，部分重要实验还包含详细的结果分析，其中不乏编者们自己的原始实验结果图片展示。
本教材主体内容划分为三篇：分子生物学实验基础、分子生物学常用实验和分子生物学综合实验。内容编排上前后关联，并层层深入。每一篇由若干章节组成，共计十四章。每一节主要陈述一个实验内容，但有的节也包含多种实验技术以供不同选择需要。除了基础性和常用分子生物学实验，本教材增加了更多的设计性和综合性实验，并纳入了一些新兴或当前正被广泛应用的实验技术，如核酸原位杂交、CRISPR/Cas9 基因编辑技术、单细胞RNA 测序、R 语言差异表达基因分析等新的实验技术内容。
本教材在整个编写过程中得到了许多专家同行的大力帮助，各参编单位克服新型冠状病毒肺炎疫情等困难积极参与，在此一并由衷感谢。但由于篇幅的限制，我们不可能收纳所有的分子生物学实验和各种理论操作细节，读者可以根据自身的需要再查阅其他专业书籍。由于编者水平的限制，书中也难免会有疏漏和不当之处，衷心希望读者指正。
刘 静 陈慧勇
2022 年2 月10 日
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