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『簡體書』聚合酶链式反应（PCR）快速检测腐烂苹果中的扩展青霉

書城自編碼： 3191669
分類：簡體書→大陸圖書→自然科學→化學
作者： 何鸿举，梁新红，何承云 著
國際書號(ISBN)： 9787518419012
出版社： 中国轻工业出版社
出版日期： 2018-05-01
版次： 1
頁數/字數： 124/160000
書度/開本： 16开 釘裝： 平装

售價：HK$ 113.6

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內容簡介：
内容包括：苹果汁中的扩展青霉污染及PCR技术应用、扩展青霉基因组DNA的提取、腐烂苹果中的真菌分离与鉴定、基于氯化苄法提取DNA的PCR检测扩展青霉方法优化、PCR扩增产物的克隆测序、扩展青霉3.3703基因组DNA快速提取、PCR特异性扩增扩展青霉3.3703和扩展青霉3.5425、扩展青霉3.5425实时 PCR快速检测条件优化、PCR快速检测不同来源扩展青霉菌的条件优化。
關於作者：
何鸿举，爱尔兰都柏林大学（University College Dublin）博士，河南科技学院特聘教授、硕士生导师、食品无损检测与分析团队带头人，主要从事食品质量分析与快速检测研究。近五年主持或参与科研项目13项，发表论文30余篇，以第一作者发表高水平SCI论文10篇，主编教材2部，并担任食品科技领域20余种SCI期刊审稿人。
目錄：
第一章 苹果汁中的扩展青霉污染及PCR技术应用
第一节 我国苹果及其加工生产状况
一、苹果特性及其营养价值
二、我国苹果的生产现状与发展前景
三、我国苹果加工面临的竞争与挑战
第二节 棒曲霉毒素
一、理化性质与危害
二、分析方法
第三节 扩展青霉
一、概述
二、检测方法
第四节 PCR技术应用概述
一、PCR技术原理
二、PCR检测技术的发展
三、PCR技术在微生物检测领域的应用
第五节 真菌DNA提取
第六节 克隆测序
一、感受态细胞的制备
二、蓝白筛选的原理
三、电泳的原理
第七节 本研究的目的意义、内容及技术路线
一、研究目的及意义
二、研究内容
三、研究的技术路线
第二章 扩展青霉基因组DNA的提取
第一节 材料与方法
一、试验菌株与培养基
二、主要试剂
三、主要仪器
四、菌体培养与收集
五、DNA提取方法
六、DNA检测方法
七、PCR扩增方法
八、凝胶电泳检测方法
第二节 结果与分析
一、培养方式的选择
二、五种提取扩展青霉基因组DNA方法的比较
三、五种提取方法所提DNA结果的比较
四、电泳检测所提DNA的结果
五、PCR扩增结果
第三节 结论与讨论
第三章 腐烂苹果中的真菌分离与鉴定
第一节 材料与方法
一、材料与试剂
二、仪器与设备
三、方法与步骤
第二节 结果与分析
一、棒曲霉素产生菌的主要种类
二、不同产地腐烂苹果中棒曲霉素产生菌的差异
第三节 结论与讨论
第四章 基于氯化苄法提取DNA的PCR检测扩展青霉方法优化
第一节 材料与仪器
一、主要原材料
二、主要试剂
三、主要仪器设备
第二节 方法与步骤
一、引物选择
二、退火温度的优化
三、引物浓度的选择
四、模板浓度的选择
第三节 结果与分析
一、引物的选择
二、退火温度
三、引物浓度优化结果
四、模板浓度
五、特异性
六、灵敏性检测结果
第四节 结论与讨论
第五章 PCR扩增产物的克隆测序
第一节 材料与仪器
一、主要试剂
二、主要仪器设备
第二节 方法与步骤
一、感受态细胞的制备
二、PCR扩增产物回收纯化
三、克隆质粒的构建
四、转化感受态细胞
五、质粒DNA制备
六、质粒的双酶切鉴定
七、测序
第三节 结果与分析
一、转化结果
二、阳性克隆鉴定结果
三、测序与Blast结果
第四节 结论与讨论
第六章 扩展青霉3.3703基因组DNA快速提取
第一节 材料与方法
一、材料与试剂
二、仪器与设备
三、方法与步骤
四、提取DNA的纯度及浓度检测
五、PCR扩增
六、凝胶电泳检测
第二节 结果与分析
一、四种方法提取DNA纯度及浓度检测结果
二、四种方法提取总DNA样品检测结果
三、PCR扩增检测结果
第三节 结论与讨论
第七章 PCR特异性扩增扩展青霉3.3703和扩展青霉3.5425
第一节 材料与方法
一、材料与试剂
二、仪器与设备
三、方法与步骤
第二节 结果与分析
一、PCR扩增引物筛选结果
二、PCR引物特异性试验结果
三、PCR敏感性试验结果
第三节 结论与讨论
第八章 扩展青霉3.5425实时PCR快速检测条件优化
第一节 材料与方法
一、材料与试剂
二、仪器与设备
三、方法与步骤
第二节 结果与分析
一、退火温度对扩展青霉3.5425实时PCR结果的影响
二、引物浓度对扩展青霉3.5425实时PCR检测的影响
三、实时 PCR灵敏度检验
第三节 结论与讨论
第九章 PCR快速检测不同来源扩展青霉菌的条件优化
第一节 材料与方法
一、材料与试剂
二、主要仪器与设备
三、试验方法与步骤
四、试验真菌培养基
第二节 结果与分析
一、PCR退火温度优化结果
二、最适引物浓度的筛选
三、最适模板浓度的筛选
四、最适底物浓度的选择
五、优化参数条件下的PCR检测
六、人工感染六品的PCR检测
第三节 结论与讨论
参考文献
內容試閱：
扩展青霉菌（Penicillum expansum）是引起苹果腐烂的主要真菌之一，是一种多细胞丝状真菌，也是棒曲霉素的主要产生菌。棒曲霉素是一种致畸、致癌真菌毒素，国际上对食品中，尤其是果汁中的棒曲霉素含量有明确的规定。要控制棒曲霉素的产生量，应该从根本上控制扩展青霉的生长，最直接的方法就是对其进行准确快速检测并及时采取有效措施进行控制。传统的检测扩展青霉菌的方法主要是培养法，结合形态学的鉴定，耗时长且受主观因素影响，不能达到快速检测的目的，这就要求我们寻找一种新的检测方法。近些年来，随着聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）技术在微生物检测方面的发展和应用，其快速准确的优势发挥明显。因此，研究如何利用PCR技术快速检测棒曲霉素产生菌扩展青霉，并设法在工艺过程中对其进行控制，减少棒曲霉素产生菌，对提高苹果汁质量与安全具有重大意义。
PCR技术应用检测的基础是基因组DNA的有效提取。首先以加拿大国家食品安全研究所提供的扩展青霉菌菌株为试验原材料，通过比较5种常规的真菌DNA提取方法，获得最适合提取该扩展青霉菌基因组DNA的方法，并设计适合于该菌的特异性引物，优化PCR扩增反应条件，获得一组最佳PCR扩增扩展青霉菌DNA参数，最后进行克隆测序。主要获得以下结果：

为了进一步验证PCR技术快速扩增检测扩展青霉菌的适用性，继续以中国普通微生物菌种保藏管理中心提供的扩展青霉菌3.3703和分离自腐烂苹果中的各真菌为试验原材料，采用液体培养法比较筛选最优真菌DNA提取方法，并根据扩展青霉菌的聚半乳糖醛酸酶polygalacturonase基因内一段保守序列设计特异性PCR扩增引物，优化PCR扩增条件，获得一套最适扩增该扩展青霉DNA的优化参数，试验的主要结果如下：

本书介绍的研究结果为前期控制苹果中扩展青霉菌的产生、防止棒曲霉素的污染提供了有效的理论指导，可用于商业苹果感染扩展青霉菌的检测，也可作为使用此技术检测其他微生物的方法学参考。
本书所涉大部分试验是在西北农林科技大学樊明涛教授的指导下完成的。在试验过程中得到了西北农林科技大学食品科学与工程学院的硕士生袁晖、李瑜、李亚菲、李亚辉、刘晓娇和吕丽娟等的大力帮助，在此表示衷心感谢。同时，衷心感谢博士生王树林、贺江、刘柳、王毕妮、焦凌霞、冉军舰等在试验过程中给予的指导与建议。
由于编写时间仓促、资料有限，以及在试验操作过程中可能存在误差，书中难免存在不妥之处，敬请读者谅解，并提出宝贵意见。

 

 

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